傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

U87人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FNBP1L： FNBP1L蛋白抗體 mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 Mouse

HSAEpC-c 人類(lèi)氣道上皮細(xì)胞(HSAEpC) 500,000cells 子宮癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml 兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 Goat Anti-human IgM/Bio 標(biāo)記的羊抗人IgM 0.1ml

FOG2： GATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體 CM-H015人支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

BC-009(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml

Frizzled 9： CD349抗體 大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106)

Raw-Blue小鼠單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 Monocytic leukemia cells of Raw-Blue mice DMEM+10% FBS,不能加雙抗+200μg/ml Zeocin 大鼠纖維連接蛋白(FN)ELISA試劑盒 MHC I /RLA I (Rabbit major histocompatibility complex I )  兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi) 96T

MCSF： 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0419QSG-7701(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠纖維介素蛋白(FGL2)ELISA試劑盒 CD4(Human cluster Of differentiation)  人CD4分子 96T

MDM2： 雙微體2癌基因抗體 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929]

NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Hep G2(肝癌細(xì)胞) 大鼠纖維膠凝蛋白1(FCN1)ELISA試劑盒 BLAP (Rabbit) 兔骨堿性0酸酶 ELISA 試劑盒 96T

U87人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞HAI-1： 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體 T-105BIII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL

HT1080細(xì)胞，人成纖維肉瘤細(xì)胞 熱帶念珠菌 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類(lèi));F9-CAG-tTA-1A3 人多巴胺D1受體(D1R)ELISA 試劑盒 Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mg

HA tag(12CA5)： HA tag標(biāo)簽單克隆抗體 TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 人多巴胺(DA)ELISA 試劑盒 GFP 綠色熒光蛋白 0.5mg

Heamachrome： 血紅素抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYB