傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

Tca-8113人舌鱗癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FBXL21： FBXL21蛋白抗體 大鼠顆粒細(xì)胞(RGC)(1×106)

人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 兔子生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA 試劑盒 IgM/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

FBXO7： F-box蛋白家族FBXO7抗體 615小鼠癌瘤株;Ca759 小鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml

FBXO11： F-box蛋白家族FBXO11抗體 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T

IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA 試劑盒 CACT  大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 96T

MAdCAM-1： 粘膜血管定居因子抗體 PAK3 Others Human 人 PAK3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒 C3a (Rabbit Complement fragment 3a)  兔子補(bǔ)體片斷3a 96T

Maspin： 抑癌基因抗體 SMC-1細(xì)胞，胸膜細(xì)胞瘤 早幼粒急性白血病細(xì)胞系,HL-60細(xì)胞 小鼠子細(xì)胞;U14

HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠腺苷受體A2a(ADORA2A)ELISA試劑盒 LZM(Mouse Lysozyme)  小鼠 96T

Tca-8113人舌鱗癌細(xì)胞HCMV UL49： 人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體 動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-aEpiCGS-2-a

PPBP Protein Human 重組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人二0酸腺苷(ADP)ELISA 試劑盒 FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor) 促卵泡刺激素受體抗原 0.5mg

HLA E： 人類白細(xì)胞抗原E抗體 NGF Others Mouse 小鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA 試劑盒 FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原 0.5mg

HECTD3： E3連接酶抑制素受體3抗體 荷蘭黑白花奶牛牛肺細(xì)胞;DCL1 肺腺癌細(xì)胞，SPA-A1細(xì)胞 SCaBER(膀胱鱗癌細(xì)胞)