傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

LS1034人結(jié)腸腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GAS8： 生長(zhǎng)停滯特異性蛋白8抗體 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y

COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1ml

GPR135： G蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體 FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人腦血管平滑肌細(xì)胞裂解物HBVSMCL 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1ml

Glypican 5： 0脂?；嫉鞍拙厶?span>-5抗體 大鼠垂體瘤細(xì)胞;MMQ 腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞，SW-13細(xì)胞 Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xì)胞，小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞

HSV 1： 神經(jīng)毒性因子ICP34.5(人單皰疹病毒Ⅰ型)抗體 QSG-7701細(xì)胞，肝細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞,DLD-1細(xì)胞 CM-R053大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

ALPI Others Human 人 Alkaline Phosphatase / ALPI 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠三葉因子2(TFF2)ELISA試劑盒 ASMA  大鼠抗平滑肌抗體 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞HRPEpiC

P3X63Ag8.653小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8.653 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠三葉因子1(TFF1)ELISA試劑盒 NF-KapB p65  大鼠核因子κB亞基p65親和肽 96T

NPAS3： 神經(jīng)細(xì)胞PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-R092大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠三0酸腺苷(ATP)ELISA試劑盒 ADAM8(Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8)  小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8 96T

LS1034人結(jié)腸腺癌細(xì)胞IL-29/IFNL1： 白細(xì)胞介素29抗體 卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA 試劑盒 XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原 0.5mg

IL-22BP/IL22RA2： 白介素22受體結(jié)合蛋白抗體 OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA 試劑盒 XAF1(XIAP-associated factor 1) XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗原 0.5ml

IRAK4： 白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞 人胚肺細(xì)胞，NCI-H1563[H1563]細(xì)胞 MLTC-1(間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)