傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

SNU-182人肝癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基，無酚紅 500ml 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 Phospho-SRF (Ser103)： 0酸化血清應(yīng)答因子抗體 BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株

KLE(人子宮內(nèi)膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA 試劑盒 Phospho-SRF (Ser77)： 0酸化血清應(yīng)答因子抗體 人脊髓星形膠質(zhì)細胞(HA-sp)(1×106)

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3A1 小鼠白介素12(IL-12)ELISA試劑盒 phospho-STAT1 (Ser727)： 0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7 大鼠膀胱上皮細胞培養(yǎng)基 100mL

SLAMF1 Others Rat 大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠白介素11受體α(IL11Rα)ELISA試劑盒 phospho-STAT1 (Tyr701)： 0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2

QGY-7703細胞，人肝癌細胞 人羊膜細胞,WISH細胞 大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106 小鼠白介素11(IL11)ELISA試劑盒 Phospho-Stat2 (Tyr690)： 0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照)

LRRC4B： 神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體 CL-0033BGC823(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2

FGF18 Protein Human  FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標簽) 大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒 Mouse IgG/Cy5.5 熒光素Cy5.5標記小鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml

LCA5L： 致盲基因LCA5樣蛋白抗體 CHEK1 Others Human 人 CHK1 / CHEK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠小腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒 OVA/PE 熒光素PE標記雞卵白蛋白 0.1ml

LCA5： 致盲基因LCA5蛋白抗體 GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 纖維肉瘤細胞,HT1080細胞 Jurkat,Clone E6-1(T 淋巴細胞白血病細胞)

SNU-182人肝癌細胞HDAC7： 組蛋白去乙?；?span>7抗體 人胚腎細胞;293FT

PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞) 5×106cells/瓶×2 人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA 試劑盒 DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脫羧酶(抗原) 0.5mg

phospho-HDAC7 (Ser358)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>7抗體 FSTL5 Others Human 人 FSTL5 人細胞裂解液 (陽性對照)

腸靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA 試劑盒 EGFR- V III 人表皮生長因子受體-8(多肽片斷抗原) 0.5mg

HDAC8： 組蛋白去乙酰化酶8抗體 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL4 幼倉鼠腎細胞，BHK細胞 DCS細胞，小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞